De strijd tegen nosocomiale infecties, een multidisciplinaire aanpak Els Van Mechelen 19 december 2013 Micro organismen Overzicht • • • • • Inleiding Biomoleculen Virussen : Bouw en vermenigvuldiging Bacteriën : Bouw en vermenigvuldiging Gisten en schimmels : Bouw en vermenigvuldiging • Adherentie – kolonisatie -infectie • Besluit 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 4 Inleiding Inleiding • Nosocomiale infecties – Virussen – Bacteriën – Gisten en schimmels 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 6 Inleiding • Bouw en groei • Bestrijding nosocomiale kiemen 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 7 Biomoleculen : bouwstenen van µorganismen Biomoleculen • • • • DNA of RNA Eiwitten Lipiden Suikers 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 9 Biomoleculen: DNA/RNA 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 10 Biomoleculen: eiwitten • Keten van aminozuren 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 11 Biomoleculen: lipiden http://tsjok45.wordpress.com/2012/10/24/fylogenetica/ 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 12 Biomoleculen: suikers 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 13 Virussen Bouw Vermenigvuldiging Bouw • Slechts met elektronenmicroscoop te zien • Grootte: 10 – 400 nm • RSV - Nukleïnezuur - Eiwitmantel (capside) - Envelop(lipoproteïnen, glycoproteïnen,celmembraan) 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 15 Bouw Nukleïnezuur Eiwitmantel (capside) Geen envelop De buitenste moleculen op een virus binden op specifieke moleculen van een gastheercel 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 16 Bouw van virussen • RSV bindt specifiek op epitheelcellen van de luchtwegen • Rotavirus bindt specifiek op enterocyten • Virussen gebruiken de gastheer om eigen onderdelen te produceren en zich te vermenigvuldigen RSV http://www.bumc.bu.edu/microbiology/people/facult y/rachel-fearns-phd/ 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 17 Bacteriën Bouw Vermenigvuldiging Bouw : basis prokaryote cel • • • • • Celwand Plasmamembraan Cytoplasma Chromosoom Ribosoom http://3.bp.blogspot.com/KkKcftqm8L0/UBgJV6YU1VI/AAAAAAAAAQI/cq0Ivi 06MDY/s1600/Structure_Bacteria+.png 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 19 Bouw : Bacteriële celwand http://classes.midlandstech.edu/carterp/courses/bio225/chap04/lecture4.htm 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 20 Bouw : Bacteriële celwand http://classes.midlandstech.edu/carterp/courses/bio225/chap04/lecture4.htm 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 21 Bouw : plasmamembraan 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 22 Bouw : celwand + plasmamembraan Staphylococcus aureus Enterococcus, Pneumococcus Pseudomonas, E. coli, Enterobacter, Klebsiella http://cnx.org/content/m48064/latest/Figure_13_01_05.png 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 23 Bouw: cytoplasma chromosoom - ribosoom http://www.microbiologie.info/images/bacteriecel/functiesbacteriecel.jpg 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 24 Bouw • Facultatief : – Sporen – Kapsel – Zweepdraden – Pili, fimbriae – Plasmiden 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 25 Sporen 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 26 Sporen • Weerstandig aan slechte groeiomstandigheden • Verspreiding bacterie • Clostridium difficile en Clostridium tetani 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 27 Kapsel Vette slijmlaag rond de celwand http://dccdn.de/pictures.doccheck.com/photos/7/e/ d9211be0de997f0_m.png 19-12-2013 http://classconnection.s3.amazonaws.com/70/ flashcards/389070/png/capsule1315538410912.png Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 28 Kapsel • Bevordert de adherentie van de bacterie • Beschermt de bacterie tegen de afweer reacties van de gastheer • Voorbeelden: Klebsiella, Pseudomonas 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 29 Zweepdraden • A : monotriech • B : lofotriech • C : amfitriech • D : peritriech http://www.scienceprofonline.com/images/Flagella.jpg 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 30 Zweepdraden • Mobiliteit • Voorbeeld : Proteus 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 31 Fimbriae • Uitsteeksels • Adherentie van de bacterie • Kolonisatie - biofilmvorming http://mmbr.asm.org/content/73/3/407/F2.large.jpg 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 32 Plasmiden • Resistentie tegen antibiotica MRSA : meticilline resistente S. aureus ESBL : expanded spectrum β -lacatamase CPE : carbapenemase producerende Enterobacteriaceae • Toxines Panton Valentine Leukocidine (PVL) in S. aureus • Enzymes S. aureus S. pyogenes 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 33 Plasmiden • Kunnen zich integreren in het bacterieel chromosoom 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 34 Plasmiden • Worden doorgegeven bij de celdeling 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 35 Plasmiden F-plasmide: sexpili Conjugatie:overdracht van plasmide via F-pili http://www.sutree.com/upload/txvmzbgtvtvmjbfpmsiei/captured.jpg 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 36 Plasmiden • Transformatie : overdracht van DNA doorheen de celwand van de bacterie http://pencildown.files.wordpress.com/2012/07/tran sformation.gif 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 37 Groei en vermenigvuldiging • Zuurtegraad (pH) • Temperatuur 37 °C bij humane pathogenen • Vochtigheidsgraad • Voedingsstoffen (glucose ,…) • Omgevingsgassen (O2, CO2) • Inhibitoren 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 38 Groei en vermenigvuldiging • Celdeling door kopiëren van DNA en verdelen van het DNA over 2 dochtercellen • 20-30 min per celcyclus of generatie • Staphylococcus aureus, Salmonella, Escherichia coli • Andere bacteriën hebben een langere celcyclus vb. Mycobacterium tuberculosis 10-30 d • Logaritmische groei 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 39 19-12-2013 Tortora et al minuten 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 400 420 440 460 480 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen uur 0 1 2 3 4 5 6 7 8 aantal 1 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 2048 4096 8192 16384 32768 65536 131072 262144 524288 1048576 2097152 4194304 8388608 16777216 40 Groeicurve 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 41 Groei van bacteriën • In het labo op een aangepast voedingsmedium bij 37°C : http://basismicrobiologie.nl/biologie/zelftests/reincultuur.jpg 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 42 Gisten en schimmels Bouw Vermenigvuldiging Bouw • Eukaryote cel • Bevat echter een typische celwand met chitine : http://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigmaaldrich/articles/biofiles/biofiles-volume-40/figure-3.gif 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 44 Bouw • Aspergillus fumigatus - meercellig - Hyfen - Vruchtlichaam - Sporen (voortplanting) 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 45 Bouw • Candida - Eéncellig - Kiembuis 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 46 Vermenigvuldiging • • • • Zuurtegraad (pH) Temperatuur Vochtigheidsgraad Voedingsstoffen Aspergillus http://www.atmph.org/articles/2010/3/2 /images/AnnTropMedPublicHealth _2010_3_2_72_77192_u3.jpg 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 47 Samenvattend Verschil tussen een bacterie en een virus Bacteriecel • 1 µm Virus 300 nm • Groei zonder gastheer • • gastheer nodig moeilijker selectief te bestrijden http://www.microbiologie.info/Verschil%20tussen%20ba cterie%20en%20virus.html 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 49 Verschil tussen een bacteriecel en een humane cel 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 50 Verschil tussen een bacteriecel en een humane cel Eukaryoot Prokaryoot Grootte 6-10 µm 0,6- 2 µm Nucleus / organellen + Ribosomen 80S (40S + 60S) 70S (30S + 50 S) Celwand geen NAG-NAM peptidoglycaan 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen - 51 Verschil tussen een gist/schimmel cel en een humane cel • Gist/schimmel bevat een chitine celwand • Voor de rest : zelfde bouw van de twee celtypes Moeilijker selectief te bestrijden 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 52 Adherentie – kolonisatie - infectie Adherentie – kolonisatie - infectie • Adherentie : µorg weet zich vast te hechten aan een gastheercel • Kolonisatie van de gastheer : aanwezigheid en deling van µ org, zonder dat er sprake is van ziekte • Infectie : invasie en groei van pathogene µ organismen in het lichaam van de gastheer • Portes d’entrée (inademen, inslikken, huid, sex) en portes de sortie (speeksel, faeces, uro-genitale secreties, urine, wondvocht, bloed) 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 54 Het aantal binnendringende microörganismen • Infectieuze dosis 50 / lethale dosis 50 • ID 50 / LD 50 Aantal kiemen ID50 • • • • ID 50 van 1: Rickettsia (vlektyfus e.a.,…) ID 50 van 10: tuberculose, giardiasis,… ID 50 van 1000: Gonorrhea ID 50 van 109: Cholera 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 56 Besluit Besluit • • • • • • • Nosocomiale pathogenen zijn µorganismen Pakketjes biomoleculen Virus ≠ bacterie ≠ gist ≠ schimmel Aparte structuur per type organisme Basis / extra virulentiefactoren Selectief bestrijden mogelijk bij bacteriën Hoe lager het aantal kiemen, hoe lager de kans op kolonisatie en infectie • Portes d’entrée en de sortie bewaken! 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 58 Referenties • http://www.pearsonhighered.com/tortora10einfo/a ssets/pdf/TortoraFunkeCase_10e_CH04.pdf • Medische biochemie, Frans C. Schuit, Bohn Stafleu van Loghum, 2000 • Microbiologie en infectieziekten, Hoepelman et al., Bohn Stafleu van Loghum, 2011 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 59 19-12-2013 Nosocomiale infecties - Els Van Mechelen 60