Referentiemethoden enzymen en referentiewaarden - P

Referentie Methoden Enzymen
en
Referentie waarden
Gebruikersdag SKML sectie algemene chemie
22 mei 2008
Dr. Paul Franck
IFCC Referentie Laboratorium
HagaZiekenhuis Den Haag
10 jaar regio harmonisatie enzymen

1996: Harmonisatie Enzymen regio “Rond Vliet en Oude Rijn”
(n=19) ALAT, ALFO, Amylase, ASAT, CK, GGT en LD

1998: Publicatie resultaten :
“Multicenter harmonization of common enzyme results by fresh
patient-pool sera.”
Paul F.H. Franck, Gerard Steen, Arnold J.P.F. Lombarts, John H.M. Souverijn, and Robert K.A. van
Wermeskerken.
Clinical Chemistry 44:3 614-621 1998

1999: Ongeveer 50% van de Nederlandse NVKC regio’s
harmoniseren volgens het model “Rond Vliet en Oude Rijn” en
gebruiken dezelfde referentiewaarden.
25 jaar IFCC standaardisatie enzymen

1980: IFCC referentiemethoden voor ALAT, ASAT, CK en GGT
bij 30°C. Niet voor ALFO, Amylase en LD.

1990: Onder invloed van industrie (37° snellere reactie /
minder substraat / hulpenzymen) en hereniging Duitsland
(25°C West en 37°C Oost) wordt gekozen voor 37°C als
officiële incubatie temperatuur voor IFCC referentiemethoden.

1999: Oprichting van een wereldwijd netwerk van
referentielaboratoria (n=16), waaronder HagaZiekenhuis, dat
IFCC referentie methoden transformeert van 30° naar 37°C.

2002 -2008: Publicatie nieuwe IFCC referentiemethoden 37°C
Clin. Chem. Lab. Med: Part 1 tm 8

2002 – 2008: (Primaire) Referentie preparaten voorzien van
target / referentiewaarden
5 jaar SKML Calibratie 2000

2000: SKML wil via programma Calibratie 2000 de
verschillende klinisch chemische methoden harmoniseren via
“commutable” standaarden die voorzien zijn van targetwaarden
afkomstig van referentiemethoden.

2003: SKML brengt secundaire enzym standaard E 2003.00114
op de markt voorzien van “gemiddelde regionale”
targetwaarden.

2004: IFCC Referentielaboratoria (Milaan, Hannover en Den
Haag) voorzien SKML standaard E 2003.0114 van officiële
IFCC targetwaarden

2005: SKML start rondzending 2005 1 tm 4 (n=24) voorzien van
IFCC targetwaarden door IFCC Referentielaboratorium van
HagaZiekenhuis.
SKML rondzendingen

Sera gemengd uit één laag (A) en één “gespiket” hoog (B)
patiënten poolserum
24 x per jaar. Voorraad ingevroren -70°C.
Controle via nationale SKML / IFCC standaardisatie.

Juistheid via targetwaarden door IFCC referentiemethoden.
ASAT, Amylase, ALAT, GGT, CK en LDH. ALFO nog niet.

Veel laboratoria gebruiken wel IFCC methoden.
Echter zij zijn nog steeds op “onjuiste” wijze geharmoniseerd.
Met name LD en Amylase !
IFCC Referentie Laboratorium Den Haag
IFCC Referentie Laboratorium
HagaZiekenhuis
Den Haag
Combi Rondzending 2008 Pool A
Combi Rondzending 2008 Pool B
Primaire IFCC Standaard
SKML Standaard E 2003.0114
Rondzending voor Referentie Laboratoria RELA
100
90
Nummer 38 = Haga Referentie Laboratorium
270
300
330
360 U/l
www.dgkl-rfb.de : zie IFCC RELA surveys
Regionale harmonisatie 1996
versus
IFCC standaardisatie 2008
Evaluatie 10 jaar regionale enzym rondzendingen










6 x patiënten poolsera
2 x per jaar. Laatste tijd moeizame organisatie. Continuïteit ?
Controle regio harmonisatie via consensus / regiogemiddelde.
Juistheid ?
Op basis van bovengrens referentiewaarden ingesteld.
ASAT, ALAT, GGT, CK en LDH zijn IFCC geharmoniseerd
ALFO, LD en Amylase zijn niet IFCC geharmoniseerd.
Samenvattend:
Controle op harmonisatie maar niet op juistheid.
Continuïteit niet gewaarborgd.
Toekomst regionale enzym kwaliteit

Kan de SKML enzym rondzending als vervanger van de Regio
enzym rondzending dienen ?

Zijn SKML enzym preparaten even goed als patiënten sera
“gespiket” met humaan recombinant enzymen en dus
“commutable”?

Verschil Regionale harmonisatie en IFCC standaardisatie ?

Hoe van Regionale harmonisatie naar IFCC standaardisatie ?
Correlatie / regressie-analyse resultaten uit
IFCC Referentiemethode m.b.v. verse patiënten poolsera
en
SKML Combi / IFCC Enzym Rondzending m.b.v. ingevroren patiënten
poolsera “gespiket” met humaan recombinant enzymen
versus
Regionale Referentiemethode (Beckman Coulter Synchron LX 20
HagaZiekenhuis) voor zowel verse patiënten poolsera als de SKML
Combi monsters
ASAT
IFCC referentie methode:
5 patiënten pool sera
2005: Helling = 1,07 Intercept = - 8,7
SKML enzym rondzending 2005 1 tm 4:
Sera (n=24) gemengd uit pool A en B
beiden voorzien van targetwaarden
IFCC referentiemethode
SKML 2005: Helling = 1,08 Intercept = -8,7
SKML 2006: Helling = 1,10 Intercept = -6,6
SKML 2007: Helling = 1,12 Intercept = -7,5
ALAT
2005: Helling = 0,92 Intercept = 1,7
SKML 2005: Helling = 0,94 Intercept = 1,5
SKML 2006: Helling = 0,99 Intercept = 0,5
SKML 2007: Helling = 0,99 Intercept = 1,7
CK
2005: Helling = 1,03 Intercept = -10,4
SKML 2006: Helling = 1,02 Intercept = 0,5
SKML 2007: Helling = 1,03 Intercept = -2,8
GGT
2005: Helling = 0,75 Intercept = 10,2
SKML 2005: Helling = 0,83 Intercept = 3,8
SKML 2006: Helling = 0,86 Intercept = 2,3
SKML 2006: Helling = 0,89 Intercept = 1.7
LDH
2005: Helling = 1,79 Intercept = 15,4
SKML 2005: Helling = 1,72 Intercept = 28,7
SKML 2006: Helling = 1,78 Intercept = 31,6
SKML 2007: Helling = 1,79 Intercept = 24,5
Amylase
2005: Helling = 1,74 Intercept = 8,7
SKML 2005: Helling = 1,79 Intercept = 6,0
SKML 2006: Helling = 1.79 Intercept = -3,3
SKML 2007: Helling = 1.75 Intercept = -1,8
Conclusie

SKML Combi enquête monsters zijn
commutable en gedragen zich als
patiënten sera in zowel
IFCC- Referentiemethode als
Beckman Coulter IFCC methode.
IFCC Standaardisatie
Regio Den Haag en Leiden
Procedure aanpassen calibratie enzymen




Neem de uitslagen van de SKML Chemie Combi enquête 2006
Voer de getallen in een Regressie programma (Passing en Bablok)
X = SKML / IFCC targetwaarde
Y = Individuele laboratorium waarde
Beoordeel helling en intercept. Naar verwachting nagenoeg geen
intercept.
De gevonden helling is de correctie-factor waarmee de calibratie-factor
wordt aanpast en wel door te delen.
b.v. Y = aX + b = 0.92 X + 0,01
Calibratiefactor Apparaat / 0.92 of
Calibratiefactor Apparaat x 1 / 0.92 = Calibratiefactor Apparaat x 1.09
LDH SKML Combi 2006 monsters U/l
HagaZiekenhuis Leyweg
2500
BC Synchron LX 20 U/l
2000
1500
1000
Y = 1,78 X + 32
cor. factor = 0,56
500
0
0
500
1000
1500
2000
IFCC methode Referentielaboratorium U/L
2500
ALAT SKML Combi 2006 monsters U/l
HagaZiekenhuis Leyweg
250
BC Synchron LX 20 U/l
200
150
100
Y = 0,99 X - 0,5
cor. factor = 1,01
50
0
0
50
100
150
200
IFCC methode Referentielaboratorium U/l
250
Introductie IFCC Standaardisatie in Regio

Ieder laboratorium berekend zijn correctie-factor 2005 en 2006.
Reproduceerbaarheid wordt hiermee gecontroleerd

Correctie factoren versturen naar P. Franck.

Resultaten van Regionale Enzym Rondzending maart 2006 worden bewerkt.

Resultaat presenteren in Regio vergadering van december 2007.

Aanpassing per 1 juli 2008.

Zelfde brief naar aanvragers versturen
Argument: Internationale Standaardisatie van Enzymen.
IFCC standaardisatie: correctie factor m.b.v SKML Combi 2006 monsters
Diac Leiden
Rijnland
LUMC
Langeland Zoetermeer
MCH Anthoniushove
MCH Westeinde
Bronovo
HagaZiekenhuis Sportlaan
HagaZiekenhuis Leyweg
ASAT
ALAT
LDH
GGT
CK
AMYL
0,92
1,00
0,52
1,16
1,04
0,53
0,92
1,05
0,54
1,08
1,01
0,53
0,72
0,92
0,48
1,08
0,99
0,50
0,87
1,00
0,60
1,16
0,97
0,97
0,94
0,51
1,03
0,97
0,54
0,94
0,92
0,55
1,07
1,01
0,54
0,92
1,03
0,60
1,04
1,01
0,55
0,94
1,01
0,57
1,10
0,98
0,52
0,95
1,01
0,56
1,16
0,98
0,56
Groen aangegeven factoren zijn voorafgaande voorbeelden van HagaZiekenhuis Leyweg
Regionale Rondzending maart 2006: 6 patiënten monsters
ASAT na IFCC / SKML standaardisatie
500
500
450
450
400
400
Bronovo
Diac. Leiden
Individeel Laboratorium U/l
Individueel Laboratorium U/l
ASAT voor IFCC / SKML staandardisatie
350
300
250
200
150
350
Lange Land
300
200
150
50
0
0
300
Consensus Regio U/l
400
500
MCH_W
Rijnland
50
200
LUMC
MCH_A
100
100
Leyenburg
250
100
0
JKZ-RKZ
Gemid.
IFCC
0
100
200
300
400
IFCC methode Referentielaboratorium U/l
500
Regionale Rondzending maart 2006: 6 patiënten monsters
ALAT voor IFCC / SKML standaardisatie
ALAT na IFCC / SKML Standaardisatie
400
400
Bronovo
350
350
Diac. Leiden
JKZ-RKZ
300
Individueel Laboratorium U/l
Individueel Laboratorium
300
250
200
150
Leyenburg
250
LUMC
MCH_A
200
MCH_W
Rijnland
150
Gemid.
100
100
50
50
0
Lange Land
IFCC
0
0
100
200
Consensus Regio U/l
300
400
0
100
200
300
IFCC methode Referentielaboratorium U/l
400
Regionale Rondzending maart 2006: 6 patiënten monsters
GGT na IFCC / SKML standaardisatie
GGT voor IFCC / SKML standaardisatie
900
900
Bronovo
800
Diac. Leiden
800
JKZ-RKZ
Lange Land
700
Individueel Laboratorium U/l
Individueel Laboratorium U/l
700
600
500
400
300
Leyenburg
MCH_A
Rijnland
IFCC
300
100
100
0
0
Consensus Regio U/l
Gemid.
400
200
100 200 300 400 500 600 700 800 900
MCH_W
500
200
0
LUMC
600
0
100 200 300 400 500 600 700 800 900
IFCC methode Referentielaboratorium U/l
Regionale Rondzending maart 2006: 6 patiënten monsters
CK voor IFCC / SKML standaardisatie
CK na IFCC / SKML standaardisatie
2500
2500
Bronovo
Diac. Leiden
JKZ-RKZ
Individueel Laboratorium U/l
Individueel Laboratorium U/l
Lange Land
2000
2000
1500
1000
Leyenburg
LUMC
MCH_A
1500
Rijnland
Gemid.
500
0
0
500
1000
1500
Consensus Regio U/l
2000
2500
IFCC
1000
500
0
MCH_W
0
500
1000
1500
2000
2500
IFCC methode Referentielaboratorium U/l
Regionale Rondzending maart 2006: 6 patiënten monsters
LDH voor IFCC / SKML standardisatie
LDH na IFCC / SKML standaardisatie
2000
2000
Bronovo
Diac. Leiden
1500
Individueel Laboratorium U/l
Individueel Laboratorium U/l
JKZ-RKZ
1000
500
0
1500
Lange Land
Leyenburg
LUMC
MCH_A
MCH_W
1000
Rijnland
Gemid.
IFCC
500
0
0
500
1000
Consensus Regio U/l
1500
2000
0
250
500
750
IFCC methode Referentielaboratorium U/l
1000
Regionale Rondzending maart 2006: 6 patiënten monsters
Amylase na IFCC / SKML standaardisatie
Amylase voor IFCC / SKML standaardisatie
1000
1000
900
900
Bronovo
Diac. Leiden
JKZ-RKZ
Individueel Laboratorium U/l
Individueel Laboratorium U/L
800
700
600
500
400
300
800
MCH_W
300
0
Consensus Regio U/l
1000
Gemid.
IFCC
0
800
Rijnland
400
100
600
MCH_A
500
100
400
LUMC
600
200
200
Leyenburg
700
200
0
Lange Land
0
100
200
300
400
IFCC methode Referentielaboratorium U/l
500
VC % regio voor en na IFCC harmonisatie m.b.v.SKML combi 2006
ASAT
ALAT
GGT
CK
LD
AMYL
Gemiddelde
VOOR
4,2
4,4
3,7
5,5
4,1
3,9
NA
4,7
1,7
3,2
6,1
5,7
1,4
4,3
3,8
Tea% (Ricos)
15,2
32,1
11,4
30,3
11,4
15,7
Conclusie

SKML Combi enquête monsters zijn heel
bruikbaar om de regio af te stemmen op
de IFCC referentiemethode.

Regio Enzym Rondzending kan hiermee
vervallen.
Referentiewaarden Regio = IFCC exact
Huidig Regio Voorlopig IFCC
ASAT
m
v
40
40
35
31
Regio Den Haag Leiden
vanaf 1 juli 2008
35
31
ALAT
m
v
45
45
45
34
45
34
GGT
m
v
50
35
55
38
55
38
CK
m
v
200
170
171
145
171
145
LDH
m
v
450
450
248
247
248
248
Amylase
m
v
220
220
107
107
107
107
Clin Chem Lab Med; 40 (6/7) 2002
 Einde
Haga
210
240
Roche
270 U/l
Gemiddelde = 3,92 mkat/l = 235 U/l
SD = 0,155
CV = 4,0%
Hoog - Laag = 0,586
% verschil = 15,0%