CD4+CD25+ Tcells protect against experimantally indiced asthma and

CD4+CD25+ Tcells protect
against experimentally induced
asthma and alter pulmonairy
dendritic cell phenotype and
function
Introductie
• Allergene astma :
– chronische inflammatie ziekte
– resultaat v. type 2-dominante immuun respons
– regulatie door type 2 cytokines (IL-4 ; IL-5 ;
IL-13)
Introductie
• Treg-cellen:
– cellen met capaciteit om Tcel proliferatie en
effector functie te limiteren
– inductie van Treg celen faciliteert de
onderdrukking van allergene inflammatie en
AHR door IL-10 en TGF-β
Treg-cellen
Doelstelling onderzoek
• De mate bepalen waarin T-reg cellen de
ontwikkeling van exp. geïnduceerde astma
voorkomen in A/J muizen (astma
susceptibele) en C3H muizen (resistant)
Resultaten
Treg depletie maakt C3H muizen
gevoelig aan ontwikkeling van AHR
• Belang van Treg in de ontwikkeling van
astma
• Treg depletie via anti-CD25 of isotype
controle
• A/J muizen: gevoelig aan AHR
C3H muizen: resistent
HDM model
Intra-tracheaal
isotype vs
aCD25
Depletie van Treg cellen verhoogt
IgE synthese en Th2 cytokine
productie
Effect van Treg depletie op HMD
respons
• Longcellen van HMD A/J en C3H muizen
in cultuur
HMD restimulatie
Cytokine productie meten
Geen effect anti-CD25 behandeling
bij A/J muizen! Niet veroorzaakt
door incomplete T reg cel depletie
• Is er verschillend aantal T reg cellen bij A/J
en C3H muizen ?
• -> FACS analyse
i.T PBS controls
HDM sens. &
Challenged
HDM + aCD25
Vergelijken van CD4CD25
geïnduceerde suppressie van Teff
proliferatie bij A/J en C3H muizen
• Cocultuur van Treg cellen en Teff cellen
• Tcellen afkomstig van HMD-gevoelige en
gechallengde dieren
• Cellen werden gestimuleerd met latex
beads
Treg cel depletie tijdens initiatie van
immuun respons is sufficiënt voor
verhoogde AHR in C3H muizen
• In welk stadium zijn Treg noodzakelijk voor
onderdrukken van ontwikkeling van AHR ?
Depletie van Treg cellen verhoogt
de frequentie van imm. Pulm. CD’s
Pulm. CD’s van anti-CD25-treated
dieren hebben verhoogde co-stim.
mol expressie
• Onderzoeken van de T cel stimulatorische
capaciteit van pulmonaire CD’s van C3H
muizen
• Kijken naar expressie van MHC II, CD80,
CD86
Pulm DC’s van anti-CD25-treated
C3Hmuizen hebben verhoogde
stimulatorische capaciteit
• Regelen T reg cellen de immunostimulatorische capaciteit van DC’s?
Discussie
• CD4+CD25+ Treg cellen limiteren de
ontwikkeling van AHR
• Treg cellen limiteren eosinofielen maar
niet type 2 cytokine productie
• Allergie gaat samen met defect in
regulatorische capaciteit
• Limiteren van ontwikkeling van AHR is niet
door Treg interactie met Teff
Discussie
• Effect van Treg, niet via IL-10 of ICOS
• Shift naar m-DC’s = ontwikkeling van hoog
immunogene populatie van pulmonale
DC’s
• Treg cellen stimuleren IFN-γ productie en
IFN-γ stimuleert IL-12 productie
= mogelijke mechanisme
Samenvatting
• Natuurlijke Treg cellen spelen een
belangrijke rol
• Treg cellen controleren DC activatie en
antigen presentatie