Examenvragen Methoden ‘16-‘17 17/01 NM: Hoofdvragen: Hoe kunnen we genoomwijd verschillen in DNA methylaties aantonen mbv het Illumina platform Leg het principe van PET uit, bij welk type radionucliden wordt dit gebruikt en geef 2 voorbeelden met hun klinische toepassing Bij multiple sclerose is een verhoogde expressie van miRNA-145 aangetoond. Hoe zou je kunnen bevestigen of dit een effect heeft en welk effect het heeft 17/01: VM Hoofdvragen: leg confocale microscopie en 2photonmicroscopie uit en vergelijk leg ARMS PCR uit en geef een toepassing hiervoor Overexpressie van een ABC1 eiwit bij Alzheimer patiënten: onderzoek of het gebruikt zou kunnen worden bij therapie MKV: wat is MAPPIT? wat is SEQUENOM? Itraq dient voor 18S piek dubbel zo groot als 28S piek bij bioanalyser wilt zeggen: Pyrosequencing: STED is voluit: DELFIA is voluit: bij beschadigd DNA door straling... Bij proxiimty ligation assay… voor wat dient ICAT 16/01 NM Hoofdvragen: Leg uit hoe in Q-RT-PCR een absolute kwantificatie kan gedaan worden door middel van een standaardcurve Leg two-photon microscopie uit In een bepaalde tumor komt er een mutatie voor in het BRAF eiwit. Waar deze mutatie zich voordoet is al gekend. Men denkt dat BRAF zijn invasiviteit verwerft door middel van eiwit-eiwit interactie. Welke methoden zal je gebruiken om dit aan te tonen? 19/01 NM MKV: Leg fluxomics uit: stable isotope-resolved metabolomics (uitleggen en ook het NMR spectrum en MS spectrum kunnen tekenen/uitleggen wat er gebeurd doordat je de C13 isotoop toevoegd) leg PCR-screening uit: wat is het voordeel ten opzichte van de klassieke methode? (dus uitleggen en dan zeggen dat je bij PCR screening niet hoeft uit te platen in vergelijking met bv filterscreening). Je hebt een nieuwe auto-immuunziekte ontdekt. Hoe ga je aantonen dat dit ook effectief een auto-immuunziekte is, hoe ga je het mechanisme erachter ontrafelen en bedenk een methode om deze ziekte aan te tonen en op te volgen. Leg stap voor stap uit! wat is ARMS? (letterlijk afkorting kennen) wat is STED? (letterlijk afkorting geven) SILAC wordt gebruik voor… (differentiele proteomics) je hebt en staal geanalyseerd met de bioanalyser en krijgt te zien dat de piek van 18S dubbel zo groot is als die van 28S: het RNA is : (A=intact B=partieel gedegradeerd C= helemaal gedegradeerd D=gecontamineerd met eiwitten) wat gebeurde er met de populatie na de kernramp in Chernobyl? (ik dacht groter aantal leukemie patienten, niet zeker…) Een potter elvehjem wordt gebruikt voor? (homogenisatie van biologisch weefsel) 2 vragen over electrofysiologie (iets met voltage clamp en een stelling kiezen die juist was) je hebt RNA tumorweefsel en van gezond weefsel, met welke van de vier technieken kan je deze het beste vergelijken? een vraag over FAIRE ( bij elke optie stond het proces kort uitgelegd, je moest diegene kiezen die het correcte proces omschreef) gemethyleerd dna (?) kan aangetoont worden door bisulfiet toe te voegen. Vier opties over wat het effect was van bisulfiet (niet-gemethyleerde C omzetten naar U, geen herkenning meer van primers) je kreeg 4 primers gegeven en moest zeggen welke niet geschikt was voor PCR (er was eentje die zou hybridiseren doordat de complement van het eind aan het begin paste, die was dus fout) 20/01 NM Hoofdvragen: leg PCR-screening uit: wat is het voordeel ten opzichte van de klassieke methode? Leg Yeast 2 Hybrid methode uit Een bepaalde ziekte door een defect gen, geeft bepaalde symptomen. Het zorgt ook voor een veranderde lipidenmetabolisme. Toon dit aan 23/01 VM Hoofdvragen: Leg Single Cell Proteomics uit. Geef twee manieren om aan vergelijkende transcriptoomanalyse te doen (DNA micro arrays en RNAseq) 24/01 NM Hoofdvragen: Bespreek 4 methoden om een specifiek eiwit in een een complex weefselstaal te kwantificeren. Bespreek PET. Welk type radionuclide wordt hierbij gebruikt? Geef 2 voorbeelden van radiofarmaca en hun voornaamste klinische toepassing. NGS heeft recent aangetoond dat bij een hartaandoening ADS er vaak een mutatie aanwezig is in een bepaald gen die codeert voor een bepaalde TF. Hoe kan je nu aantonen dat de aandoening veroorzaakt wordt door de mutatie. Hoe ga je te werk, welke methoden gebruik je? 25/01 hoofdvragen leg uit sequencing by ligation en hoe dit in next generation sequencing gebruikt wordt. leg het principe van PALM uit Bij een neurodegeneratieve ziekte precipiteert ataxin-3 meer dan normaal. Bij patiënten is er een polyglutaminisatie in het gen. Normaal heb je 31 glutaminen en bij de ziekte kan dit oplopen tot 71. Hoe kan je aantonen dat deze polyglutaminisatie aan de basis ligt van deze ziekte. MKV beste temporele resolutie van technieken van hoofdstuk 15 fluxomics besturen kan via: NMR en MS Massarray stellingen hoe werkt DNase footprinting Taqman: hoe werkt het voor wat kan DELFIA gebruikt worden