De Levende Legpuzzel Feike van der Leij Tortora, 2014: Microbiology bacteriechromosoom plasmiden gen voor blauwe kolonies gen tegen penicilline knipplaats gen voor blauwe kolonies gen tegen penicilline opengeknipt gen voor blauwe kolonies gen tegen penicilline te kloneren stukjes DNA gevangen DNA onderbroken gen geeft witte kolonies gen tegen penicilline plasmide is ietsje groter geworden dit plasmide heeft niets gevangen en levert blauwe kolonies gen tegen penicilline niet gevangen DNA aantal bacteriën goed groeiende (= delende) bacteriën tijd “competente“ bacterie na Ca++ behandeling bij 0oC doorlaatbaar plasmiden TRANSFORMATIE opgenomen plasmide niet opgenomen plasmiden Een mutant FENOTYPE Een mutant gen GENOTYPE Een mutant FENOTYPE Een mutant gen GENOTYPE GENETICA “FORWARD GENETICS” Een mutant GENETICA “FORWARD GENETICS” Een mutant gen - POSITIONEEL KLONEREN - KANDIDAAT GEN Een mutant GENETICA “FORWARD GENETICS” Een mutant gen - POSITIONEEL KLONEREN - KANDIDAAT GEN - SHOTGUN KLONEREN A mutant FORWARD GENETICS A mutant gene SHOTGUN CLONING Een mutant GENETICA “FORWARD GENETICS” Een gemuteerd gen SHOTGUN KLONERING Voorbeeld: Levende Legpuzzel (Jumbo legpuzzeliensis) Een wildtype puzzel HLS41 Gene Hunting Een mutante puzzel Fenotype: headless deer Genotype: hld HLS41 Gene Hunting Op zoek naar het HLD gen…. HLS41 Gene Hunting WANTED: HLD Kandidaat genen van andere puzzels Positioneel kloneren ahv genetische kaart HLS41 Gene Hunting SHOTGUN cloning !!! HLS41 Gene Hunting HLS41 Gene Hunting Een gerepareerde puzzel ( dit noemen we complementatie ) HLS41 Gene Hunting Realisatie van de Levende Legpuzzel is mogelijk gemaakt door een subsidie van het Ministerie van Economische Zaken © Feike R. van der Leij, Hogeschool Van Hall Larenstein 2006 - 2016