Studiefiche Vanaf academiejaar 2015-2016 Gentechnologie I (C003366) Cursusomvang (nominale waarden; effectieve waarden kunnen verschillen per opleiding) Studiepunten 4.0 Studietijd 110 u Contacturen 25.0 u Aanbodsessies en werkvormen in academiejaar 2016-2017 A (semester 2) hoorcollege Lesgevers in academiejaar 2016-2017 Van Craenenbroeck, Kathleen Berx, Geert 25.0 u WE10 WE14 Aangeboden in onderstaande opleidingen in 2016-2017 Bachelor of Science in de biochemie en de biotechnologie Verantwoordelijk lesgever Medelesgever stptn 4 aanbodsessie A Onderwijstalen Nederlands Trefwoorden Restrictie-enzymen, modificatie-enzymen, opzuivering-scheiding-detectie-kwantificatie van DNA en RNA, plasmiden, klonering: mechanismen en vectoren, mutagenese, DNA sequenering, heterologe genexpressie bij prokaryoten Situering Aanbrengen van de basistechnieken die gebruikt worden in de recombinant DNAtechnologie. Analytische en preparatieve methoden voor DNA-onderzoek. Gespecialiseerde RNA-analysetechnieken. Voorstelling van geselecteerde systemen voor hoog-efficiënte expressie van gekloneerde genen in Escherichia coli. Inhoud 1. Introductie (wat verstaan we onder gentechnologie - overzicht kloneringsproces) 2. DNA en RNA-modificerende enzymes (Restrictie-enzymes, andere nucleasen, DNA en RNA Ligasen, kinasen, fosfatasen, DNA en RNA Polymerase, Topoisomerasen, Recombinase/clonase) 3. Opzuivering DNA/RNA 4. Scheiding en detectie DNA (agarose gel, Polyacrylamide gel, Detectiemethoden, denaturerende gels, Pulsed field elektroforese, Analytische gelscheiding, Preparatieve gelscheiding en elutietechnieken, Capilaire elektroforese en lab on a chip) 5. PCR (Overzicht + optimalisatie, Analyse van PCR producten, Toepassingen PCR + afgeleide technieken zoals diagnostica, Kloneren met behulp van PCR, RAPD (rapid amplified polymorphic DNA) analyse, AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism) PCR, Real-time PCR of quantitatieve PCR 6. mRNA analyse (isolatie van RNA, methodes voor het analyseren van mRNA zoals Northern blot analyse, RT-PCR, Macro- en microarray) 7. Mutagenese (Plaatsspecifieke mutagenese, willekeurige mutagenese) 8. Vectoren (Plasmiden, enkelstrengige DNA-fagen, Faagmiden, Faagvectoren afgeleid van de faag λ, Cosmiden, Supervectoren: YACs en BACs, constructie van een genomische bank) 9. kloneringsmethodes (Klassieke kloneringsmethode, TOPO klonering, Gateway klonering, Creator klonering) 10 Labelingsmethodes DNA/RNA 11. DNA sequentie bepaling (Chemische en Dideoxy sequeneringsmethoden, Pyrosequeneren, Sequencing by oligoligation and detection: SOLiD sequencing, ‘Sequencing by synthesis’ technologie: Illumina (Solexa) sequenering, Ion Torrent) 12 Transformatie van bacteriën (methodes an analyse) 13. Heterologe genexpressie in bacteriën (Functionele elementen van een prokaryoot expressieplasmide, Phage-display, optimalisaties, voorbeelden) (Goedgekeurd) 1 Begincompetenties De student wordt geacht inzicht te hebben in de opbouw van het genetisch materiaal. Deze basis wordt verworven in de inleidende vakken Biochemie, Genetica I en Moleculaire biologie I. Eindcompetenties 1 De student is vertrouwd met de basistechnieken van de recombinant DNA 1 technologie. 2 Hij heeft inzicht in het instrumentarium dat ter beschikking staat om genen te 1 kloneren, doelgericht te wijzigen en in prokaryoten tot expressie te brengen. 3 Hij zal in staat zijn de meest aangewezen benadering voor een bepaalde 1 vraagstelling te kiezen. Creditcontractvoorwaarde Toelating tot dit opleidingsonderdeel via creditcontract is mogelijk mits gunstige beoordeling van de competenties Examencontractvoorwaarde Dit opleidingsonderdeel kan niet via examencontract gevolgd worden Didactische werkvormen Hoorcollege Leermateriaal Nederlandstalige cursus (geschatte printkosten: 25 euro) Referenties Nuttige websites en relevante publicaties worden in de les meegegeven / op minerva geplaatst. De aankoop van een handboek is niet nodig. Vakinhoudelijke studiebegeleiding Tijdens de hoorcolleges worden voorbeelden gegeven van de vraagstelling zoals die op het examen wordt opgevat. De lesgevers zijn ter beschikking voor toelichting (dit kan via e-mail of in een persoonlijk onderhoud). Via gezamenlijke oefeningen en discussies wordt er dieper ingegaan op de materie, zo kunnen de studenten peilen naar hun inzichten in de leerstof en ook op een meer persoonlijke basis vragen aan de docenten stellen rond bepaalde onderdelen van de cursus. Evaluatiemomenten periodegebonden evaluatie Evaluatievormen bij periodegebonden evaluatie in de eerste examenperiode Schriftelijk examen met open vragen, mondeling examen Evaluatievormen bij periodegebonden evaluatie in de tweede examenperiode Schriftelijk examen met open vragen, mondeling examen Evaluatievormen bij niet-periodegebonden evaluatie Tweede examenkans in geval van niet-periodegebonden evaluatie Niet van toepassing Toelichtingen bij de evaluatievormen Een deel van de vragen toetst de parate kennis; een ander deel omvat opdrachten met meerdere antwoordmogelijkheden en is gericht op inzicht in de leerstof. Eindscoreberekening periode gebonden evaluatie (deel Kathleen Van Craenenbroeck): 50% periode gebonden evaluatie (deel Geert Berx): 50% Voor beide delen moet minimaal 9/20 behaald worden om te kunnen slagen. (Goedgekeurd) 2