HIV replicatie HIV Infectie CD4 Binding CD4 (= receptor op MHC II) MHCII: Macrofaag T-helpercel Enzymen Het virus brengt meerdere enzymen mee: Reverse transcriptse Integrase .. Reverse Transcriptase ss RNA ds DNA Gebeurt in cytoplasma van de cel Integrase Knipt + OH DNA (van virus) Integrase Transport in celkern Knipt DNA (gastheer) Bindt DNA (virus) + DNA (gastheer) Reparatie knipplaats Virus replicatie Tijdens normale transcriptie ook processing= Pre-mRNA wordt beschermd door: capping polyadenylering Capping > 25 nucleotiden gesynthetiseerd Methylguanosine bindt aan 5` eind Voorkomt afbraak Splicing Exonen code voor eiwit Intronen geen code voor eiwit Alternatieve splicing Verschillende intronen verwijderd Ook exonen verwijderd Resultaat?? Pre-mRNA coderen kan voor verschillende eiwitten HIV Gebruikt splicing EN alternatieve splicing Virus DNA in genoom is zeer kort maar codeert voor 9 genen Polyandilering Stopt RNA polymerase bij AAUAAA Plakt polyA-staart aan 5` Translatie Ribosoom bestaat uit 2 sub-eenheden (klein en groot) Kleine sub-eenheid bindt aan cap Scant tot startcodon (AUG) Kleine + grote sub-eenheid binden start translatie Leaky scanning Kleine subeenheid slaat soms startcodon over = afhankelijk van de sequentie om het startcodon Resultaat? Meerdere eiwitten HIV Meerdere eiwitten op 1 mRNA Worden allemaal afgelezen door leaky scanning Frame shifting Ontstaat door lus in mRNA GGA GGA GGA GAG GAG GAG Eerder stopcodon = kort eiwit Andere triplets = ander eiwit HIV Frameshifting in Gag (door RNA lus) Hierdoor ontstaat Gag-Pol Gag codeert voor alle onderdelen van HIV Gag-Pol codeert voor: Reverse transcriptase Integrase Protease ( maturatie virusdeeltje) Maturatie Protease knipt zichzelf los van Gag-Pol Protease knipt Gag op 5 plaatsen virion, membraan, RNA Protease knipt Gag-Pol RT + integrase HIV Diagnostische toets 10 minuten Model Pas model aan