Vierde nascholingssessie

Isolatie van DNA uit kiwi
•Hak kiwi fijn in een bekerglas.
•Voeg 3 g keukenzout toe en 10 ml detergent.
•Voeg al roerend 100 ml water toe.
Detergent vormt een complex met membraanfosfolipiden.
Na+-ionen van het keukenzout binden met de negatief
geladen fosfaatgroepen van het DNA.
Isolatie van DNA uit kiwi
•Zet het mengsel 15 min in een waterbad van 60 °C.
De hoge temperatuur denatureert de DNAse enzymen die
normaal het DNA zouden knippen.
Isolatie van DNA uit kiwi
•Koel 5 min af in en ijswaterbad.
Afkoelen in een ijswaterbad voor 5 min vertraagt de
afbraak van het DNA.
•Mix alles krachtig gedurende 5 s.
Kort mixen doet de celwanden en het celmembraan verder
afbreken waardoor het DNA vrijkomt zonder zelf af te
breken.
Isolatie van DNA uit kiwi
•Giet het mengsel door een filter in een reageerbuis. Let er op dat er
geen schuim meekomt.
•Druppel voorzichtig 9 ml ijsgekoelde alcohol langs de wand van de
reageerbuis.
Isolatie van DNA uit kiwi
Er verschijnen witte draden op de grenslaag tussen alcohol
en het mengsel. DNA is onoplosbaar in ijskoude ethanol.
Dus deze draden zijn DNA moleculen
•Zuig met een pipet de witte dradige massa op en laat ze uitvlokken in
een 4 % zoutoplossing. Er ontstaat een wit neerslag.
Isolatie van DNA uit kiwi
•Breng met een pasteurpipet wat van de neerslag op een wit papiertje en voeg
er universeel indicator aan toe.
DNA is een zuur!
a~F
mw
totale massa = massa wagentje + aandrijfmassa
totale massa blijft constant
versnelling van het wagentje ~ aandrijfkracht
a = ma.g/ (mw + ma)
ma
a ~ 1/m
mw
totale massa = massa wagentje + aandrijfmassa
De aandrijfkracht blijft constant
versnelling van het wagentje ~ 1/massa
a = ma.g/ (mw + ma)
ma
Tweede beginsel van Newton