Isoleren van DNA uit kiwi

Isoleren van DNA uit kiwi
Doel
Bij het DNA isoleren uit kiwi, maak je kennis met werkzaamheden van een biologisch analist.
Vooraf regelen
Zout, een bekerglas van 400 ml, een bekerglas van 250 ml, een erlenmeyer van 100ml, 1 maatcilinder
van 100 ml, 2 maatcilinders van 10 mL, wijde reageerbuis, shampoo, gedestilleerd water, kiwi,
staafmixer, waterbad van 60°C, trechter, papieren filter, pipet van 10 ml, ijskoude ethanol, glasstaafje
of Pasteur pipet, klok of stopwatch, weegschaal.
Aan de slag
A Het maken van een extract
1. Doe 3 gram zout in een bekerglas van 250 mL. Voeg 10 mL shampoo toe. Voeg 100 mL
gedestilleerd water toe. Roer alles door elkaar.
2. Schil een kiwi en snijd hem in kleine stukjes. Pureer de kiwi met een staafmixer in het bekerglas
van 400 ml.
3. Roer de gepureerde kiwi door het mengsel van water, zout en shampoo.
4. Zet het bekerglas 15 minuten in een waterbad van 60°C.
5. Filtreer het mengsel door een papieren filter, vang het filtraat op in de erlenmeyer van 100ml. Het
filtraat vormt het kiwi extract.
B Het isoleren van DNA
6. Meet 10 mL kiwi extract af in een maatcylinder en breng dit over in een wijde reageerbuis.
7. De TOA meet 10 mL ijskoude (uit de diepvries) ethanol af in een maatcilinder
8. Houd de reageerbuis schuin en de TOA schenkt de ijskoude ethanol heel voorzichtig(!!) op het
extract. Extract en ethanol moeten zo weinig mogelijk mengen.
9. Laat de reageerbuis 3 minuten helemaal stil staan.
10. Wacht tot je op het grensvlak van het extract en ethanol een soort gelatine met witte vlokken en
gasbelletjes ziet. Dit is DNA met daarin ontstane gasbelletjes. Na enige tijd gaat deze prop
omhoog door de opwaartse kracht in de gasbelletjes. Je kunt nu met een glasstaafje voelen hoe
stevig de prop DNA is, of deze uit de reageerbuis halen met behulp van een Pasteur pipet.
Reflectie en theoretische vragen die je maakt tijdens de 15 minuten wachttijd.
1. a. Welke celonderdelen heeft de cel.
2 …………………………………….
4 …………………………………….
5 …………………………………….
6 ………………………………………
b. Uit welke stoffen bestaat een membraan.
c. Waarvoor gebruiken wij de staafmixer.
d. Waarom voegen wij shampoo toe.
Geef uitleg!
2 Het DNA molecuul ligt opgerold om de eiwitmoleculen. Zout verandert de structuur van eiwitten.
Wat verandert er door het zout aan de DNA-structuur?
3 Wat is een filtraat?
4 Enzymen zijn opgebouwd uit…………………
5 En deze……………… bestaan weer uit……………………………
6 Waar worden eiwitten gemaakt.
7 In DNA binden bepaalde stikstofbasen met elkaar. Welke:
1………………………………
2……………………………….
3………………………………..
4…………………………………