Verticillium spP. In Cauliflower
advertisement
Cindy Lecluyse Promotor: Bart Quartier Stagementoren: Soraya França Sarah Van Beneden Stagegever: Prof. dr. ir. Monica Höfte Inhoudsopgave Verticillium In vitro pathogeniciteit In vivo pathogeniciteit + interactie Detectie Species-Specifieke PCR Tellen van aantal kiemkrachtige microscleroten in grond Besluit Verticillium Veroorzaakt vasculaire aandoeningen De belangrijkste Verticillium spp. in dit werk: V. longisporum= plantpathogene schimmel die de asymmetrische vergeling, verwelking en dwerggroei bij bloemkool veroorzaakt. V. tricorpus = zwakke pathogeen, mogelijk biologische bestrijder van V. longisporum. vorming microscleroten = overlevingsstructuren die tot 15 jaar in de grond kunnen overleven Verticillium – Levenscyclus Verticillium in België Nog geen effectieve bestrijding tegen Verticillium verwelking In West-Vlaanderen: sporadische aantasting • Voorgaande veldexperimenten: naast V. longisporum ook aanwezigheid van V. tricorpus. In velden met aanwezigheid van beide species geen aantasting! In Klein-Brabant: veel aantasting, nauwelijks aanwezigheid van V. tricorpus DOEL: Interactie tussen V. tricorpus en V. longisporum bestuderen V. tricorpus mogelijke biologische bestrijder van V. longisporum In vitro pathogeniciteit Gamborg B5 Medium in cultuurbuizen Inoculatie van bloemkoolras ‘Clapton’ met V. longisporum en V. tricorpus Geen uiterlijke symptomen zichtbaar Vers gewicht van de in vitro planten (‘Clapton’) Groeistimulatie door V. tricorpus In vitro pathogeniciteit Worteloppervlak ‘Clapton’ bedekt door microscleroten (%) V. longisporum V. tricorpus Meer microscleroten bij behandeling met V. tricorpus → resistentie reactie plant? In vitro pathogeniciteit Microscleroten binnenin de wortelcortex van plant ‘Clapton’ geïnoculeerd met V. tricorpus In vivo pathogeniciteit + interactie Bloemkolen van het ras ‘Cornell’ Grond bevloeiingsmethode, inoculatie met sporensuspensie 4 behandelingen: Nummer behandeling Eerste behandeling Tweede behandeling (1 week later) 1 Water Water 2 Water V. longisporum 3 Water V. tricorpus 4 V. tricorpus V. longisporum In vivo pathogeniciteit + interactie Na 4 weken: eerste symptomen van Verticillium zichtbaar In vivo pathogeniciteit + interactie Eindevaluatie: zwartverkleuring van de xyleemvaten (score 03) Verdeling van de scores: Combinatie hier geen effect op bescherming van de plant. Detectie van Verticillium in grondstalen Telling van aantal microscleroten op MSEA (Modified Soil Extract Agar) Nadelen: ○ Tijdrovend ○ Soms moeilijk onderscheid tussen microscleroten van verschillende species Species-specifieke PCR biedt mogelijk een oplossing Voordelen: ○ Snel ○ Nauwkeurig Species-specifieke PCR Optimalisatie van de species-specifieke PCR van V. longisporum en V. tricorpus. Snel en nauwkeurig opsporen van deze species in grondstalen Eerste stap van optimalisatie is afgerond. L 1 2 3 Bepaling aantal kiemkrachtige microscleroten in grondstalen Bevestiging van voorgaande tellingen Grondstalen Klein-Brabant West-Vlaanderen Drogen, natte zeving, uitplaten op MSEA Na 4 weken: telling Microscleroten V. longisporum 200 µm Microscleroten V. tricorpus 200 µm Bepaling aantal kiemkrachtige microscleroten in grondstalen West-Vlaanderen: praktisch in alle grondstalen aanwezigheid van V. tricorpus. Klein-Brabant: slechts één grondstaal met aanwezigheid van V. tricorpus. BESLUIT In vitro pathogeniciteit: ○ V. tricorpus groeistimulatie in ‘Clapton’, ○ Meer microscleroten bij behandeling met V. tricorpus → resistentie reactie plant? In vivo pathogeniciteit + interactie: ○ V. tricorpus kon de plant hier niet beschermen tegen V. longisporum Species-specifieke PCR: ○ PCR van V. longisporum en V. tricorpus geoptimaliseerd. Bepaling aantal microscleroten in grondstalen: ○ In West-Vlaanderen: aanwezigheid van V. tricorpus in praktisch alle grondstalen ○ In Klein-Brabant: slechts in één grondstaal aanwezigheid van V. tricorpus Bedankt voor jullie aandacht! Stagementoren: Soraya França Sarah Van Beneden Promotor: Bart Quartier Stagegever: Prof. dr. ir. Monica Höfte Het lectorencorps van BLT Vragen? Cindy Lecluyse Promotor: Bart Quartier Stagementoren: Soraya França Sarah Van Beneden Stagegever: Prof. dr. ir. Monica Höfte
