24-07-2017 317519221 MICROBIOLOGIE DEEL I J. SWINGS en A. WILLEMS 2003-2004 INHOUDSTABEL De nummers verwijzen naar de nummering in "Biology of Microorganisms", 10de ed. (2003). 1. INLEIDING Alle paragrafen 2. OVERZICHT VAN MICROBIEEL LEVEN 2.1. Elementen van cellen en virale structuur 2.3. Evolutionaire verwantschappen bij levende organismen 3. MACROMOLECULEN Fig 3.4, 3.5, 3.6, 3.7 4. STRUKTUUR EN FUNCTIE VAN DE MICROBIËLE CEL 4.1. 4.3. 4.4. 4.5. 4.6. 4.7. 4.8. Microscopen en microscopie - Licht-microscoop, fasecontrast, fluorescentiemicroscopie - Kleuringsmethoden, de Gram-kleuring Electronenmicroscopie De cellulaire struktuur - prokaryoten en eukaryoten - De prokaryote cel; komponenten - Morfologie van prokaryoten Afmetingen, vormen (coccen, staafjes, spirillen, spirocheten, cellen met aanhangsels (hyfen) - De eukaryote microbiële cel - Afmetingen van micro-organismen en het belang van klein te zijn Struktuur van de cytoplasmatische membraan - Chemische samenstelling - de fosfolipide dubbellaag - Eukaryote en prokaryote celmembranen - Membraanversterkende elementen: sterolen en hopanoiden - Celmembraan bij de Archaea - Andere kenmerken; transmembranaire eiwitten Funktie van de celmembranen - Osmose, plasmolyse - De celmembraan als permeabiliteitsbarrière Membraantransportsystemen - Transmembranaire transporteiwitten - uniport, symport, antiport - Werkingsmechanisme van membraan transporteiwitten. Lac permease Groep translocatie Actief transport dmv ABC transporters De celwand van prokaryoten - Overzicht celwand Gram-positieve en Gram-negatieve bacteriën - Peptidoglycaanlaag (mureïne) - Het glycaandeel - Het peptidedeel: L- en D-aminozuren, diaminopimelinezuur. - Peptiden bij Escherichia coli en Staphylococcus aureus - Diversiteit van peptidoglycaan - Gram-positieve bacteriën, teichoïnezuren en lipoteichoïnezuren - Pseudopeptidoglycaan - Protoplastvorming - Osmose, lyse en protoplastvorming - Werking van lysozyme 24-07-2017 1 24-07-2017 317519221 De celwand van Gram-negatieve bacteriën lipopolysacchariden, buitenste ('outer') membraan, lipoproteïnen, periplasmatische ruimte, endotoxinen Permeabiliteit van de Gram-negatieve cel; porinen en het periplasma Verband celwandstruktuur en Gram-kleuring 4.10 & 4.11. Flagellen en beweeglijkheid - Bacteriële flagellen en verschillende types van flagellatie polair, peritrich, subpolair; lofotrich, amfitrich - Flagellaire struktuur; flagelline, haak; basaal lichaam met ringen - Mechanisme van flagellaire beweging - Groei van het flagel 4.12. Bacterieel gedrag: Chemotaxis, fototaxis en andere taxis - Positieve en negatieve chemotaxis. Attractantia en afstotende chemicaliën - Experimenteel bewijs van chemotaxis en fototaxis - Voortbeweging en rondtollen - Andere taxis 4.13. Bacteriële oppervlakte strukturen en cel-inklusies Fimbriae en pili. De pilus bij E. coli Andere funkties van fimbriae en pili S -lagen Kapsels en slijmlaag. Glycocalyx. Struktuur Aantonen van kapsel. Funktie Inclusies en reservematerialen - Poly-ß-hydroxyboterzuur, poly-ß-hydroxyalkanoaten - glycogeen - polyfosfaat, metachromatische granules - elementaire zwavelbolletjes - magnetosomen 4.14. Gasvacuolen 4.15. Bacteriële endosporen Voorkomen en struktuur; eigenschappen;de cortex ; kieming dipicolinezuur Vorming van endosporen 4.9. 5. METABOLISME, BIOSYNTHESE EN VOEDING EN LABORATORIUMKWEEK 5.1. 5.2. 5.3. Microbiële voeding - Belangrijkste macronutriënten: C, N - Andere macronutriënten: P, S, K, Mg, Ca, Na, Fe Fe: sideroforen, hydroxaminezuur-derivaten, enterobactine - Micronutriënten: Co, Zn, Mo, Cu, Mn, Ni, Se - Groeifactoren Cultuurmedia - Het in kultuur brengen van microorganismen - Reinkultuur, besmettingen - Bereiding van kultuurmedia - Het toedienen van sporenelementen - Groeifactoren: vitaminen en aminozuren - Voorbeelden van groeimedia Laboratoriumculturen van micro-organismen 6. GROEI 6.1 6.2 De groei van bacteriële cel Peptidoglycansynthese - Celwand synthese en celdeling. - Autolysinen, autolyse - Werking van penicilline 6.3. Populatie-groei - groeisnelheid, generatietijd, exponentiële groei - berekening van generatietijd 6.4. De groeicyclus, groeikurve ('batch' kulturen) - Lag fase - Exponentiële fase - Stationaire fase - Afstervingsfase 6.5.& 6.6. Meten van groei - Telling van totaal aantal cellen 24-07-2017 2 6.7. 6.8. 6.9. 6.10. 6.11. 6.12. 6.13. 24-07-2017 317519221 - Telling van levende cellen - Bepaling van celmassa, turbiditeitsmeting Continu kultuur, chemostaat - Steady state, dilutiesnelheid - Effekt van uitwendige faktoren op groei Effect van de temperatuur op de microbiële groei - Groei bij lage temperatuur (psychrofielen, facultatief psychrofielen) Microbiële groei bij koude temperaturen - Leven bij <0°C Microbiële groei bij hoge temperaturen - Leven bij hoge temperatuur - Ecologie van thermofielen en hyperthermofielen - Thermofielen en biotechnologie Zuurtegraad (pH) - Acidofielen en alkalinofielen Osmofiele effecten: beschikbaarheid van water - Halotoleranten, halofielen, extreem halofielen; osmofielen, xerofielen - Hoe overleven bij verminderde 'water potentiaal'? Zuurstof - Aëroben, anaëroben; facultatief anaëroben, micro-aërofielen - Toxische vormen van zuurstof - Catalase, peroxidase, superoxide dismutase - Strikt (obligaat) anaërobe microorganismen 7. PRINCIPES VAN MICROBIELE MOLECULAIRE BIOLOGIE 7.3. DNA structuur en supercoiling 30. INDUSTRIELE MICROBIOLOGIE 30.1. 30.2. 30.3. 30.4. 30.5. 30.6. Industriële micro-organismen en hun producten Groei en productvorming in industriële processen Eigenschappen van grootschalige fermentaties Up-scaling van fermentaties Isolatie en characterizering van antibiotica Industriële productie van antibiotica: alleen penicilline; productie van aminoglycosidenen tetracyclines is niet te kennen 30.7. Vitaminen en aminozuren 30.9. Enzymen 30.12. Gist 30.13. Alcohol en alcohol-houdende dranken Wijn Bier Distillaten 30.14 Voedsel van micro-organismen 20. CONTROLE VAN DE MICROBIELE GROEI 20.1. Warmtesterilisatie - Sterilisatie door hitte - Sporen en sterilisatie - De autoclaaf 20.2. Sterilisatie door straling 20.3. Filter sterilisatie - Verschillende soorten filters (dieptefilters, membraanfilters en nuclepore filters) 20.4. Chemische kontrole van microbiële groei - Bacteriostatische, bactericiede en bacteriolytische agentia - De minimale inhibitorische concentratie (MIC) 20.5. Desinfectantia en antiseptica 20.6. Synthetische antibacteriele chemotherapeutische agentia - Groeifactoranalogen - Sulfamiden en andere groeifactor-analogen 20.7. Doelwit van de antibiotica 20.8. Beta-lactam antibiotica: penicillines en cefalosporines - Types van penicilline - Werkingsmechanisme 20.9. Antibiotica uit Prokaryoten 20.12. Resistentie t.o.v. antibiotica - Weerstandsmechanismen - R plasmiden en hun oorsprong - Verspreiding van antibiotica weerstandigheid 24-07-2017 3 24-07-2017 317519221 21. INTERACTIES TUSSEN GASTHEER EN MICRO-ORGANISME -Inleiding - Parasiet, gastheer, pathogeen micro-organisme - Pathogeniciteit, virulentie, infektie 21.1 Microbiële interacties met hogere organismen - Muceuse membranen 21.2. Normale flora van de huid 21.3. Normale flora van de mondholte - Tanden en tandplaque - Caries en Streptococcus sobrinus en S. mutans 21.4. Normale flora van spijsverteringsstelsel - Maag, dundarm, colon - Intestinale gassen 21.5. Normale flora van andere lichaamsdelen - Ademhalingsstelsel - Urogenitaal stelsel 21.6. Het binnendringen van pathogeen micro-organisme in de gastheer - Specifieke adhesie - Penetratie van epitheelcellen 21.7. Kolonisatie en groei - Localisatie van pathogeen micro-organisme in het lichaam - Rol van enzymes bij invasie 21.8.& 21.9 Virulentie 21.10 Exotoxinen:alleen tetanos en cholera 21.11 Enterotoxinen: allen cholera 24-07-2017 4