College hs 4

06/05/15
Peter Parham
The Immune System
Fourth Edition
Chapter 4
Antibody Structure and the Generation
of B-Cell Diversity
•  Klonale selec*e •  An*lichaam repertoire: 109 (prak*jk) – 1016(theore*sch) •  Agammaglobulinemie 1
2
Copyright © Garland Science 2015
Structuur van an*lichaam (IgG) • 
• 
3
Fragment an*gen binding (Fab) Fragment crystallizable (Fc) 4
1
06/05/15
Flexibele scharnier maakt verschillende ruimtelijke oriënta*es mogelijk Structuur van de verschillende klassen antilichamen
•  Verschillen in C-­‐regio’s bepalen isotype/klasse •  Lichte keten twee isotypes: κ (kappa) en λ (lambda) 5
6
7
8
•  Vier domeinen per fragment •  Immunoglobulinedomein: •  100-­‐110 aminozuren •  Compact en stabiel •  Immunoglobuline superfamilie 2
06/05/15
Driedimensionale structuur lichte keten •  Sandwich van twee β-­‐sheets •  Verbonden door hydrofobe interac*es 9
Variabiliteit is beperkt tot specifieke domeinen 10
Twee soorten mul*valente an*genen • Hypervariabele regio’s (HV/CDR) à loops • Framework regio’s (FR) 11
12
3
06/05/15
Twee soorten epitopen De bindingssite voor an*genen is veelzijdig •  Binding berust uitsluitend op non-­‐covalente krachten •  Groter bindingsoppervlak à grotere affiniteit 13
14
An*lichamen voor klinisch gebruik 1.  B-­‐cellen van muis immuniseren met an*gen 2.  B-­‐cellen van muis fuseren met tumorcellen 3.  Selecteren van hybride cellen 4.  Juiste hybridoma selecteren 5.  Kloneren 6.  Produc*e monoklonale an*lichamen •  An*serum •  Hybridoma’s •  Flowcytometrie •  Therapeu*sche monoklonale an*lichamen 15
16
4
06/05/15
•  Analyseren van celpopula*es à detec*e van fouten mogelijk •  Kan tot 18 celoppervlaktemarkers tegelijk 17
• 
Muis: transplanta*es à afsto*ng • 
Chimeer: rituximab bij behandeling van non-­‐hodgkin lymfoom à tegen CD20 • 
Gehumaniseerd: Bij behandeling van allergische astma à tegen IgE • 
Humaan: tegen TNF-­‐α bij reumatoïde artri*s 18
5