Workshop bloed- en beenmergonderzoek

advertisement
Alice Gerrits (& Betty van der Veen)
Laboratoriumspecialist Klinische Chemie, Isala, Zwolle (& AMC, Amsterdam)
Bloedafname
Een goed begin = het halve werk!
Laboratoria in Nederland
•
•
•
•
Klinische chemie: lichaamseigen stoffen en cellen
Apotheek: lichaamsvreemde stoffen (bijv. medicijnen)
Microbiologie: “beestjes”(virussen & bacteriën)
Pathologie: weefselonderzoek
Klinisch chemisch laboratorium
• Bloed, maar ook andere lichaamsvloeistoffen
(bijv. urine en beenmerg)
• Doel:
– Vaststellen of uitsluiten van een ziekte
– Volgen van het verloop van een ziekte
– Vaststellen van het succes van een behandeling
– Voorkómen van een ziekte
Meten = Weten!
Verschillende werkplekken
• “Routine-lab” (24/7 open)
–
–
–
–
–
Chemie (eiwitten, zouten, vetten, hormonen, ..)
Hematologie (bloedcellen en hemoglobine)
Stolling
Bloedtransfusie (bloedgroepen)
Urine
• “Bijzonder lab” (kantooruren)
– Beenmergonderzoek
– DNA onderzoek
• Extern lab (monster wordt verzonden)
Verschillende buizen
Stolling
Chemie
Chemie
Hematologie
Glucose
Snelcursus bloed
Waaruit bestaat bloed?
Rode bloedcellen
Bloedvat
Witte bloedcellen
Plasma
Bloedplaatjes
Snelcursus bloed
Wat zijn de functies van de verschillende soorten bloedcellen?
• Rode bloedcellen
Zuurstoftransport
• Witte bloedcellen
Afweer tegen infecties
• Bloedplaatjes
Bloedstolling
Samenstelling van bloed
• 4 - 6 liter bloed
• Plasma (~55%)
– 93% water
– 7% opgeloste stoffen
(eiwitten, zouten, vetten,
suikers, hormonen, vitaminen)
• Cellen (~45%)
– Rode bloedcellen
– Witte bloedcellen
– Bloedplaatjes
Voorbewerking van bloed
Het laboratorium van TOEN…
… versus het laboratorium van NU
Klinisch Chemisch Laboratorium, Isala, Zwolle
Laboratoriumonderzoek bij MPN
• Bloedonderzoek
– Celtellingen
– Microscopische beoordeling
• Beenmergonderzoek
– Punctaat en biopt
• DNA onderzoek
– JAK2, CALR en MPL mutaties
Celtellingen
Automatische celteller
•
•
•
•
•
Aantal rode bloedcellen
Aantal witte bloedcellen
Aantal verschillende soorten witte bloedcellen
Aantal bloedplaatjes
Hemoglobine (Hb)  maat voor het aantal rode bloedcellen
Verschillende soorten witte bloedcellen
Neutrofiel
T-lymfocyt
Eosinofiel
Basofiel
B-lymfocyt
Monocyt
Het aantal bloedcellen
MF
(begin)
MF
(later)

()

M: 8,5 - 11,0 mmol/L
Hemoglobine (Hb) V: 7,5 - 10,0 mmol/L

()

Witte bloedcellen
4,0 - 10,0 x10^9/L


Bloedplaatjes
150 - 400 x10^9/L

Bloedcellen
Referentiewaarden*
PV
Rode bloedcellen
M: 4,4 – 5,8 x10^12/L
V: 4,0 – 5,3 x10^12/L
ET


* Kunnen verschillen per laboratorium;  = verlaagd,  = verhoogd


Bloeduitstrijkje maken
Gezond persoon
Witte bloedcellen
Bloedplaatjes
Rode bloedcellen
Met dank aan: J.W. Koopmans, Unitcoördinator beenmergcytologie. Stg. KCL Leeuwarden
PV patiënt
Witte bloedcellen
Te veel rode bloedcellen (licht roze)
Met dank aan: J.W. Koopmans, Unitcoördinator beenmergcytologie. Stg. KCL Leeuwarden
GEZOND
PERSOON
PV
PATIENT
ET patiënt
Te veel en klontering
van bloedplaatjes
Met dank aan: J.W. Koopmans, Unitcoördinator beenmergcytologie. Stg. KCL Leeuwarden
MF patiënt
Traandruppelcellen
Onrijpe rode bloedcel
Onrijpe witte bloedcel
Leuko-erytroblastair bloedbeeld
Met dank aan: J.W. Koopmans, Unitcoördinator beenmergcytologie. Stg. KCL Leeuwarden
Laboratoriumonderzoek bij MPN
• Bloedonderzoek
– Celtellingen
– Microscopische beoordeling
• Beenmergonderzoek
– Punctaat en biopt
• DNA onderzoek
– JAK2, CALR en MPL mutaties
Snelcursus beenmerg
Hoeveel rode bloedcellen worden er per seconde aangemaakt?
2.000.000!
Bloedvorming vanuit stamcellen
STAMCEL
RODE
BLOEDCEL
WITTE
BLOEDCEL
BLOED
PLAATJE
P
Bloed
RIJ
Beenmerg
VO
OR
LO
PER
STA
M
Bloedvorming in het beenmerg
P
Bloed
RIJ
Beenmerg
VO
OR
LO
PER
STA
M
Sig
EnPa
Ole
n
Regulatie bloedaanmaak
Beenmergpunctie
bovenarmen
borstbeen
en ribben
STERNUMPUNCTIE
wervels
bekken
CRISTAPUNCTIE
Beenmergaspiraat & -biopt
Beenmergaspiraat
Beenmergbiopt
Snelle beoordeling
Kost meer tijd
Losse cellen (details)
Cellen in weefselverband
DNA onderzoek
Geen DNA-onderzoek
Soms "dry tap"
Altijd mogelijk
Vervezeling (fibrose)
Een gouden combinatie
Beenmergaspiraat
Met dank aan: dr. G. Ponjee, Klinisch chemicus MC Haaglanden, Den Haag
Met dank aan: dr. G. Ponjee, Klinisch chemicus MC Haaglanden, Den Haag
Kleuringen
Beenmergbiopt
Met z’n vijven tegelijk!
Normaal beenmerg
Voorlopercellen rode cellen
Mogelijke stamcel
Voorlopercellen witte cellen
Voorloper trombocyten
(bloedplaatjes)
Gezond persoon
Voorlopercellen van rode bloedcellen
Met dank aan: J.W. Koopmans, Unitcoördinator beenmergcytologie. Stg. KCL Leeuwarden
PV patiënt
Gezond persoon
ET patiënt
Megakaryocyten
(te veel en te groot)
Megakaryocyten
Met dank aan: J.W. Koopmans, Unitcoördinator beenmergcytologie. Stg. KCL Leeuwarden
MF patiënt
Gezond persoon
Afwijkende
megakaryocyten
Botbalkje
Botbalkje
Vervezeling
Met dank aan: dr. R.E. Kibbelaar , patholoog bij Pathologie Friesland
Botbalkje met
botaantasting
MF patiënt
Laboratoriumonderzoek bij MPN
• Bloedonderzoek
– Celtellingen
– Microscopische beoordeling
• Beenmergonderzoek
– Punctaat en biopt
• DNA onderzoek
– JAK2, CALR en MPL mutaties
Snelcursus DNA
Bijv. JAK2
Mutatie (fout)
Snelcursus DNA
• Hoe lang is het DNA uit 1 cel, helemaal uitgerekt?
– 2 meter!
• Hoe lang is het DNA uit ons hele lichaam, helemaal uitgerekt?
– 10.000x de afstand tussen de aarde en de maan & terug!
DNA mutaties bij MPNs
Pas sinds eind 2013 bekend!
P
Bloed
RIJ
Beenmerg
VO
OR
LO
PER
STA
M
Sig
EnPa
Ole
n
Regulatie bloedaanmaak
P
Bloed
RIJ
Beenmerg
VO
OR
LO
PER
Sig
n
STA
M
ale
n
Ongecontroleerde bloedaanmaak
M
UT
AT
IE
DNA onderzoek
• In bloed of in beenmergaspiraat
1. DNA wordt uit de cellen gehaald
2. Specifiek stukje DNA wordt
vermeerderd m.b.v. PCR
3. In de verschillende genen wordt
gekeken of een mutatie (fout)
aanwezig is
Voor meer informatie: www.nvkc.nl
Voor meer informatie:
www.nvkc.nl
VIRTUELE RONDLEIDING
OP HET LABORATORIUM
Download