Validatie van de autoclaaf SMI 136x6
advertisement
VALIDATIE VAN DE AUTOCLAAF SMI 136X6 METHODEVALIDATIE VAN DE SELECTIVITEIT VAN VITAMINE B1 EN C IN DAVITAMON JUNIOR 1-3 SIROOP Airi Cluyse VALIDATIE VAN DE AUTOCLAAF SMI 136X6 Airi Cluyse AUTOCLAAF SMI 136X6 Wordt gebruikt voor: Sterilisatie: Filters Gezuiverd water Magneten Tween 80 Vernietiging van voedingsbodems waar groei op gedetecteerd is 3 VALIDATIE AUTOCLAAF Gebruik bij elke sterilisatie: Sterilisatiekleefband Stoomindicator Validatie: Sterikon® plus bio-indicatoren => Om jaarlijkse controle van de autoclaaf toe te passen 4 VALIDATIE AUTOCLAAF Sterikon® plus bio-indicatoren Ampullen met sporen van Geobacillus Stearothermophilus kleuromslag: paars geel Instellingen: 20 minuten 121°C 48 uur incubatie op 60°C 5 VALIDATIE AUTOCLAAF Sterikon® plus bio-indicatoren Resultaat: Net na autoclaveren: Niet geautoclaveerde ampul: paars geautoclaveerde ampul: paars-roze Na incubatie op 60°C: geautoclaveerde ampullen: paars-roze controle (niet geautoclaveerd): geel 6 VALIDATIE AUTOCLAAF Conclusie: Sterikon® plus bio-indicatoren: Methode zal jaarlijks worden toegepast als extra controle van de werking van de autoclaaf Bowie & Dick testpakketjes: Werkt niet bij autoclaaf zonder vacuümpomp 7 METHODEVALIDATIE VAN DE SELECTIVITEIT VAN VITAMINE B1 EN C IN DAVITAMON JUNIOR 1-3 SIROOP Airi Cluyse METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Multivitaminesiroop Nieuw product Toediening aan kinderen van 1 tot 3 jaar (voedingssupplement) Opstellen analysemethode voor vitamine B1 en C 1e stap: methode bepalen en instellen 2e stap: selectiviteit bepalen 3e stap: lineariteit bepalen 9 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 UPLC-kolom kolom: ACQUITY UPLC HSS T3 1,8 µm (2,1 x 100 mm) Kolomtemperatuur: 30°C Flow rate: 0,45 mL/min Runtijd: 17,5 min Met deze gradiënt: overdruk (15000 psi) 10 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Wijziging: Kolomtemperatuur: 35°C Tragere overgang van ene eluens naar ander eluens ( runtijd: 21,5 min) geen overdruk meer, pieken gescheiden 11 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Identificatie van vitamine B1 en C Vitamine B1: tR (min) = 1,118 Vitamine C: tR (min) = 0,938 12 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Bepaling van de selectiviteit Selectiviteit tov excipientia = placebo Selectiviteit tov bewaarmiddelen = placebo met bewaarmiddelen Selectiviteit tov degradatieproducten = placebo bewaard op 40°C 13 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Bepaling van de selectiviteit Selectiviteit tov eluens D 14 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Bepaling van de runtijd Staal wordt ingezet met runtijd = 120 min 15 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Tijdstip Gemiddelde % onaf- Gemiddelde % onaf- area gebroken area gebroken vitamine B1 vitamine B1 vitamine C vitamine C 72759 97,23% 1372158 99,60% 70726 94,52% 1329056 96,47% 69901 93,41% 1174042 85,22% 69797 93,27% 1122095 81,45% 84471 99,27% 1321043 98,89% 83247 97,84% 1287089 96,34% 81499 95,78% 1082327 81,02% Standaard Start analyse + 6 uur na start analyse + 24 uur na start analyse 29 uur na start analyse Berekening afbraak vitaminen in functie van de tijd Placebo + standaard-additie Start analyse + 4 uur na start analyse + 22 uur na start analyse + 27 uur na start analyse 16 81427 95,70% 1030399 77,13% METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 HPLC-kolom kolom: ATLANTIS DC 18,5 µm (4,6 x 150 mm) Kolomtemperatuur: 30°C Flow rate: 1,40 mL/min Runtijd: 30 min 17 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Identificatie van vitamine B1 en C Vitamine B1: tR (min) = 3,778 Vitamine C: tR (min) = 2,274 18 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Bepaling van de selectiviteit Selectiviteit tov excipientia = placebo Selectiviteit tov bewaarmiddelen = placebo met bewaarmiddelen Selectiviteit tov degradatieproducten = placebo bewaard op 40°C 19 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Bepaling van de selectiviteit Selectiviteit tov eluens D 20 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Bepaling van de runtijd Staal wordt ingezet met runtijd = 120 min 21 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Bepaling van de lineariteit Vitamine B1 y = 15013x - 3403.8 R² = 0.9998 400000 300000 area vitC area vitB1 350000 250000 200000 150000 100000 50000 0 0.0000 5.0000 10.0000 15.0000 20.0000 25.0000 30.0000 concentratie vitB1 (µg/mL) y = 10134x + 24675 R² = 0.9998 Vitamine C 1800000 1600000 1400000 1200000 1000000 800000 600000 400000 200000 0 0.00 50.00 100.00 150.00 200.00 concentratie vitC (µg/mL) 22 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Vitamine C staal 1 staal 2 staal 3 1121410 1101214 1087067 concentratie (µg/mL) 108,22 106,23 104,83 % onafgebroken 97,94% 96,14% 94,87% staal 4 staal 5 staal 6 1072399 1046712 1036763 concentratie (µg/mL) 103,39 100,85 99,87 % onafgebroken 93,56% 91,27% 90,38% staal 1 staal 2 staal 3 270547 271532 272212 18,25 18,31 18,36 99,88% 100% 100% staal 4 staal 5 staal 6 271389 271857 271442 concentratie (µg/mL) 18,30 18,33 18,31 % onafgebroken 100% 100% 100% area area Vitamine B1 area concentratie (µg/mL) % onafgebroken area Bepaling van de lineariteit Berekening afbraak in functie van de tijd 23 METHODEVALIDATIE DAVITAMON JUNIOR 1-3 Conclusie: UPLC-kolom: Selectief voor vitamine B1 en C Pieken niet volledig van elkaar gescheiden Vitaminen breken zeer snel af HPLC-kolom Selectief voor vitamine B1 en C Pieken goed van elkaar gescheiden Vitamine B1 stabiel, vitamine C breekt ook hier af Uitgevoerde testen zijn 1e stappen voor opstellen van analyseprotocol 24 VALIDATIE VAN DE AUTOCLAAF SMI 136X6 METHODEVALIDATIE VAN DE SELECTIVITEIT VAN VITAMINE B1 EN C IN DAVITAMON JUNIOR 1-3 SIROOP Airi Cluyse